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DBH双切口酶质粒(h) | sc-402441-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
DBH双切口酶质粒(h2) | sc-402441-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
多巴胺β-羟化酶(DBH)是一种依赖铜离子的单加氧酶,催化交感神经元和肾上腺嗜铬细胞分泌囊泡内多巴胺向去甲肾上腺素的转化。通过调控多巴胺与去甲肾上腺素的平衡,DBH 影响儿茶酚胺的生物合成、肾上腺素能神经传递以及应激反应相关的神经内分泌信号传导。DBH 的活性与酪氨酸代谢及囊泡单胺处理通路相互交织,从而塑造下游肾上腺素能受体信号及与环核苷酸相关的反应。DBH 的遗传与调控变异与自主神经功能障碍及神经精神表型有关,因此是研究儿茶酚胺稳态机制的重要靶点。
DBH 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DBH 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DBH内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DBH的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DBH基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。