非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
cyclin T1 抗体 (E-3): sc-271348. K-562 (A) 和 Jurkat (B) 细胞核提取物中细胞周期蛋白 T1 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
cyclin T1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-400623
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- cyclin T1 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在cyclin T1基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：cyclin T1: sc-271348，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
cyclin T1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-400623 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
CCNT1 编码细胞周期蛋白 T1（cyclin T1），它是 P-TEFb 复合物的调控亚基，可与 CDK9 协同作用，磷酸化 RNA 聚合酶 II 并促进转录延伸。通过调控启动子近端停滞（promoter-proximal pausing），cyclin T1 影响与细胞周期推进、应激反应和分化相关的表达程序。CCNT1 的活性还与转录耦联的 RNA 加工以及染色质相关调控相交织，从而塑造整体基因表达的动态变化。P-TEFb 信号与依赖 cyclin T1 的转录调控发生失衡，已被认为与多种情境有关，包括肿瘤相关的转录程序以及与病毒转录相关的宿主—病原体相互作用。
cyclin T1 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中CCNT1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对CCNT1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏CCNT1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使cyclin T1蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建CCNT1缺失的细胞模型，用于cyclin T1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 cyclin T1 功能至关重要的 CCNT1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 CCNT1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 cyclin T1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 cyclin T1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 CCNT1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 cyclin T1 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 cyclin T1 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由CCNT1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定CCNT1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。