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CRX双切口酶质粒(h) | sc-401736-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CRX双切口酶质粒(h2) | sc-401736-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CRX(cone-rod homeobox)编码一种视网膜特异性的同源结构域转录因子,对光感受器的分化与维持至关重要。在细胞核内,CRX 通过结合顺式调控元件并与其他视网膜转录因子协同作用,协调控制光转导组分、外节生物发生以及突触成熟的基因调控程序。它调节与 cGMP 信号传导、视蛋白(opsin)表达以及维持视锥与视杆功能所需的代谢支持相关的转录网络。CRX 活性或表达的改变与遗传性视网膜变性表型相关,因此它是研究光感受器发育机制及疾病相关基因调控的重要靶点。
CRX 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CRX 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CRX内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CRX的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CRX基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。