Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Crk-L Antibody (A-1): sc-365471. Western blot analysis of Crk-L expression in untreated HCT-116 (A), chemically-treated HCT-116 (B) and K-562 (C) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgG2b BP-HRP: sc-542741. β-Actin (C4): sc-47778 used as loading control. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409.
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Crk-L双切口酶质粒(h): sc-401097-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Crk-L 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Crk-L双切酶质粒（h）和Crk-L双切酶质粒（h2）编码针对CRKL的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Crk-L: sc-365092，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Crk-L双切口酶质粒(h) | sc-401097-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Crk-L双切口酶质粒(h2) | sc-401097-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CRKL 编码 Crk-L，这是一种含 SH2/SH3 结构域的衔接蛋白，可将酪氨酸激酶信号连接到下游效应通路，从而调控细胞增殖、黏附与运动。Crk-L 通过与 CBL、BCAR1/p130CAS 和 RAPGEF1（C3G）等蛋白组装复合物，参与整合素/FAK 以及受体酪氨酸激酶网络，并影响 MAPK 与小 GTP 酶信号传导。CRKL 的剂量或信号输出发生改变与细胞迁移和存活程序失调相关；该基因座也与包括 22q11.2 相关生物学在内的基因组异常以及激酶驱动的致癌信号环境有关。这些特性使 CRKL 成为解析通路连接方式、磷酸酪氨酸依赖性复合物形成以及情境特异性信号转导的一个重要靶点。
Crk-L 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CRKL 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CRKL内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CRKL的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CRKL基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。