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CIITA慢病毒激活颗粒(m2) | sc-419390-LAC-2 | 200 µl | CNY3422.00 |
小鼠Ciita基因编码Ⅱ类主要组织相容性复合体转录激活因子(CIITA),这是一种不与DNA直接结合的主调控因子,通过与RFX、NF-Y和CREB/ATF增强体复合物相互作用,协调MHCⅡ类基因及抗原呈递相关辅助因子的转录;CIITA的活性决定了专业抗原呈递细胞中可诱导的抗原呈递功能,并可受IFN-γ等细胞因子信号刺激,从而将先天免疫信号与适应性CD4+ T细胞应答联系起来;在小鼠模型中,Ciita/CIITA功能失调与MHCⅡ类表达异常及相关免疫表型有关,涉及感染、自身免疫以及肿瘤免疫监视等过程;对Ciita进行基因编辑以及围绕CIITA的扰动研究,为阐明抗原呈递通路机制、免疫基因转录的表观遗传调控以及免疫学与炎症领域的功能基因组学筛选提供了支持。
CIITA 慢病毒激活颗粒(m2)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Ciita 表达。
CIITA 慢病毒激活颗粒(m2)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Ciita转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性CIITA表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Ciita 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。