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CIITA双切口酶质粒(h) | sc-401762-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CIITA双切口酶质粒(h2) | sc-401762-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CIITA(II 类主要组织相容性复合体转录激活因子)是抗原呈递细胞中 MHC II 类基因表达的关键主调控因子,负责协同调控 HLA-DP、HLA-DQ 和 HLA-DR 基因座的转录。CIITA 作为一种不直接结合 DNA 的共激活因子,整合来自干扰素-γ及其他炎症通路的信号,与 RFX、NF-Y 等因子共同组装增强体复合物(enhanceosome),并招募染色质修饰相关机器。通过调控抗原加工与呈递程序,CIITA 影响 CD4+ T 细胞的启动(priming)与免疫监视;CIITA 活性异常已与免疫失衡和肿瘤免疫逃逸相关。CIITA 依赖的转录网络失调也常在炎症与自身免疫表型以及宿主–病原体相互作用的研究中被关注。
CIITA 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CIITA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CIITA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CIITA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CIITA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。