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ChREBP双切口酶质粒(h) | sc-401803-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ChREBP双切口酶质粒(h2) | sc-401803-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MLXIPL 编码碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)。ChREBP 是一种对葡萄糖敏感的转录因子,可将碳水化合物的可用性与脂质生成及糖酵解相关基因的表达相耦联。在代谢信号作用下,ChREBP 与 MLX 等辅因子协同,调控含有碳水化合物反应元件的启动子,从而把营养感知与对肝脏和脂肪组织代谢的转录调控整合起来。这一调控轴参与从头脂质生成、甘油三酯合成和葡萄糖稳态等通路,使 ChREBP 的活性与营养过剩条件下的代谢重塑相联系。MLXIPL/ChREBP 信号失调与胰岛素抵抗、脂肪肝表型以及更广泛的心代谢疾病机制相关,因此是研究代谢基因网络的一个重要节点。
ChREBP 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MLXIPL 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MLXIPL内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MLXIPL的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MLXIPL基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。