非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
CDKAL1 抗体 (E-9): sc-393447. CDKAL1 在 Jurkat (A), HEL 92. 1. 7 (B), HL-60 (C), KNRK (D) 和 NIH/3T3 (E) 全细胞裂解液中表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
CDKAL1双切口酶质粒(m): sc-427224-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CDKAL1 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CDKAL1双切酶质粒（m）和CDKAL1双切酶质粒（m2）编码针对Cdkal1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CDKAL1: sc-393447，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CDKAL1双切口酶质粒(m) | sc-427224-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Cdkal1 基因编码 CDKAL1，这是一种甲硫基转移酶，可在 tRNALys(UUU) 的第 37 位点进行修饰（ms2t6A37），从而在翻译过程中支持对赖氨酸密码子的准确解码。通过维持翻译保真性，CDKAL1 影响蛋白质稳态与细胞应激反应，尤其与分泌细胞功能和代谢调控密切相关。遗传与功能研究将 CDKAL1 与葡萄糖稳态及胰腺 β 细胞功能联系起来，使其成为糖尿病相关通路中常被研究的位点。在小鼠模型中，对 Cdkal1 的扰动常用于探究 tRNA 修饰如何影响蛋白质合成、内质网应激以及下游代谢表型。
CDKAL1 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Cdkal1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Cdkal1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Cdkal1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Cdkal1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。