Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
goat anti-mouse IgG, F(ab′)2-HRP: sc-3697. Western blot analysis of Cdk5 expression in HeLa whole cell lysate. Antibody tested: Cdk5 Antibody (J-3): sc-6247.
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Cdk5双切口酶质粒(m): sc-419602-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Cdk5 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Cdk5双切酶质粒（m）和Cdk5双切酶质粒（m2）编码针对Cdk5的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Cdk5: sc-6247，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Cdk5双切口酶质粒(m) | sc-419602-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Cdk5双切口酶质粒(m2) | sc-419602-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠细胞周期依赖性激酶5（Cdk5）是一种脯氨酸导向的丝氨酸/苏氨酸激酶，通过与p35（Cdk5r1）和p39（Cdk5r2）等非周期蛋白辅因子结合而获得催化活性。Cdk5通过磷酸化微管与肌动蛋白网络中的底物，调控神经元迁移、神经突起生长、突触小泡动力学以及细胞骨架重塑，并与MAPK信号及非细胞周期依赖的激酶通路发生交叉。Cdk5活性失调与神经退行性和神经发育相关表型有关，机制包括tau蛋白及其他神经元底物磷酸化异常，以及突触稳态受损。除神经系统生物学外，Cdk5信号还参与应激反应，并在特定情境下调控细胞黏附与迁移，从而支持在多种细胞类型中开展机制研究。
Cdk5 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Cdk5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Cdk5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Cdk5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Cdk5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。