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Cdk5双切口酶质粒(h) | sc-400161-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Cdk5双切口酶质粒(h2) | sc-400161-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
细胞周期蛋白依赖性激酶 5(CDK5)编码 Cdk5,这是一种脯氨酸定向的丝氨酸/苏氨酸激酶,可由 p35(CDK5R1)和 p39(CDK5R2)等非周期蛋白辅因子激活。在人类细胞中,Cdk5 通过其底物(与 MAPK、PI3K/AKT 及应激反应通路相交)调控神经元发育、突触信号传导、细胞骨架重塑、囊泡运输以及非细胞周期依赖的磷酸化级联反应。Cdk5 活性失调及底物异常磷酸化与神经退行性过程(包括 tau 蛋白病理)以及多种疾病背景下迁移与存活程序的改变相关。由于 CDK5 同时影响信号动态与结构可塑性,它被广泛用于神经生物学、DNA 损伤应答以及由激酶网络驱动的通路串扰等模型研究。
Cdk5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CDK5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CDK5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CDK5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CDK5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。