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CDC42双切口酶质粒(h) | sc-418353-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CDC42双切口酶质粒(h2) | sc-418353-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CDC42 编码一种在多种组织中广泛表达的 Rho 家族小 GTP 酶,作为分子开关调控肌动蛋白细胞骨架重塑、细胞极性、膜运输以及胞质分裂。CDC42 在 GEF、GAP 和 GDI 的调控下在 GTP 结合态与 GDP 结合态之间循环切换,并通过 PAKs、WASP/N-WASP 以及 PAR 极性复合体等效应蛋白协同信号传导,从而调节黏附动力学与定向迁移。它还与内吞作用、囊泡出芽以及有丝分裂纺锤体取向等通路相交汇,将细胞骨架结构与细胞周期进程联系起来。CDC42 信号失调与肿瘤生物学中增殖与侵袭表型的改变有关,也与神经发育及免疫相关疾病相关,在这些疾病中细胞极性与细胞内运输过程受到扰动。
CDC42 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CDC42 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CDC42内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CDC42的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CDC42基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。