Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Cdc27 Antibody (AF3.1): sc-9972. Western blot analysis of Cdc27 expression in K-562 (A) and HEL 92.1.7 (B) whole cell lysates and A-431 (C) and Jurkat (D) nuclear extracts. Detection reagent used: m-IgG2b BP-HRP: sc-542741.
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Cdc27双切口酶质粒(h): sc-400789-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Cdc27 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Cdc27双切酶质粒（h）和Cdc27双切酶质粒（h2）编码针对CDC27的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Cdc27: sc-9972，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Cdc27双切口酶质粒(h) | sc-400789-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Cdc27双切口酶质粒(h2) | sc-400789-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 CDC27 基因编码 Cdc27 蛋白，它是后期促进复合体/周期体（APC/C）的核心四联螺旋重复序列（TPR）亚基之一。APC/C 是一种 E3 泛素连接酶，负责对关键有丝分裂调控因子进行有序蛋白水解。Cdc27 通过支持 APC/C 的组装以及与共激活因子的相互作用，促进细胞在恰当时机从中期进入后期、顺利完成有丝分裂退出，并通过调控细胞周期蛋白和 securin 的降解来维持基因组稳定性。因此，CDC27 的功能与细胞周期推进、纺锤体检查点信号传导以及泛素介导的蛋白质稳态调控密切相关。APC/C 活性改变及 CDC27 失调与染色体不稳定性和增殖表型有关，这些现象在癌症生物学及相关细胞周期疾病研究中已有报道。
Cdc27 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CDC27 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CDC27内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CDC27的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CDC27基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。