Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Cdc25A Antibody (F-6): sc-7389. Western blot analysis of Cdc25A expression in SK-N-MC (A), A549 (B), Hep G2 (C), MCF7 (D), A-431 (E) and HL-60 (F) whole cell lysates.
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Cdc25A双切口酶质粒(h): sc-400345-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Cdc25A 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Cdc25A双切酶质粒（h）和Cdc25A双切酶质粒（h2）编码针对CDC25A的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Cdc25A: sc-7389，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Cdc25A双切口酶质粒(h) | sc-400345-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Cdc25A双切口酶质粒(h2) | sc-400345-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CDC25A 编码 Cdc25A，这是一种双特异性磷酸酶，可通过去除 CDK2 和 CDK1 上的抑制性磷酸基团来激活细胞周期依赖性激酶，从而促进 G1/S 转换并推动 S 期进程。其活性受到检查点信号的严格调控，其中包括 ATR/CHK1 介导的磷酸化：在复制压力和 DNA 损伤发生时，该修饰会触发依赖泛素的降解。通过这些通路，Cdc25A 将细胞周期时序与基因组完整性监视相协调，并在功能上与 p53 和 RB 相关网络相互作用。CDC25A 的表达或稳定性失调常与异常增殖表型相关，并常在致癌信号及检查点缺陷的研究背景下被重点关注。
Cdc25A 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CDC25A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CDC25A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CDC25A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CDC25A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。