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Cdc20双切口酶质粒(h) | sc-400583-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Cdc20双切口酶质粒(h2) | sc-400583-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CDC20 编码 Cdc20 蛋白,它是后期促进复合体/周期小体(APC/C)的核心共激活因子,负责将纺锤体组装检查点信号与泛素介导的关键有丝分裂调控因子(包括 securin 和 cyclin B1)的降解相协调。通过促进后期按时启动以及顺利退出有丝分裂,Cdc20 有助于维持染色体分离的准确性和整体基因组稳定性。CDC20 的活性受 MAD2、BUBR1 等检查点蛋白调控,使其与限制非整倍体的细胞周期监视通路相联。CDC20 表达失衡或检查点控制异常,常与增殖表型及染色体不稳定性相关,并在多种癌症研究背景中频繁被观察到。
Cdc20 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CDC20 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CDC20内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CDC20的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CDC20基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。