Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Cdc2 p34 Antibody (F-10): sc-166135. Western blot analysis of Cdc2 p34 expression in K-562 (A), A-431 (B), HL-60 (C) and HeLa (D) whole cell lysates.
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Cdc2 p34双切口酶质粒(h): sc-400181-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Cdc2 p34 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Cdc2 p34双切酶质粒（h）和Cdc2 p34双切酶质粒（h2）编码针对CDK1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Cdc2 p34: sc-54，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Cdc2 p34双切口酶质粒(h) | sc-400181-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Cdc2 p34双切口酶质粒(h2) | sc-400181-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CDK1 编码丝氨酸/苏氨酸激酶 Cdc2 p34，它是驱动 G2/M 转换和有丝分裂进程的 M 期促进因子（MPF）的核心催化亚基。CDK1 的活性通过与细胞周期蛋白结合、由 CDK 激活激酶介导的激活性磷酸化，以及 WEE1/MYT1 与 CDC25 磷酸酶的抑制性调控而被精细协调，从而将检查点信号与有序的染色体分离连接起来。作为细胞周期调控网络的中心节点，CDK1 与 DNA 损伤应答和复制应激通路交叉，调控有丝分裂进入、纺锤体组装和胞质分裂。CDK1 信号失衡及检查点控制异常常见于增殖性疾病，并为在人类细胞模型中研究基因组不稳定性与细胞周期依赖性提供了机制切入点。
Cdc2 p34 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CDK1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CDK1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CDK1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CDK1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。