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CD44双切口酶质粒(m) | sc-419558-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
Cd44 编码 CD44,这是一种跨膜糖蛋白,作为透明质酸及其他细胞外基质配体的主要受体,协同调控细胞-细胞及细胞-基质黏附。在小鼠细胞中,CD44 通过与 ERM 蛋白、Rho 家族 GTP 酶以及生长因子受体信号相互衔接的通路,促进细胞骨架重塑、迁移与增殖,从而影响组织结构的建立及炎症反应。CD44 的同工型使用情况和糖基化状态会影响受体聚集及下游信号传导,进而影响白细胞转运以及与基质细胞的相互作用。CD44 活性失调常在慢性炎症、纤维化和肿瘤相关细胞运动性等背景中被研究,因此也是解析微环境驱动表型机制的常见关键节点。
CD44 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Cd44 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Cd44内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Cd44的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Cd44基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。