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CD4双切口酶质粒(h) | sc-400237-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CD4双切口酶质粒(h2) | sc-400237-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CD4 编码一种 I 型跨膜糖蛋白,主要表达于辅助性 T 淋巴细胞表面,在其中作为 MHC II 类限制性抗原识别的共受体,并通过与 Src 家族激酶 LCK 结合来增强 TCR 信号传导。通过组织免疫突触的形成并调控下游磷酸化级联反应,CD4 影响 T 细胞的激活、分化以及细胞因子程序,从而塑造适应性免疫应答。CD4 表达或信号传导的改变与免疫失衡及炎症性病理过程相关,而 CD4 阳性 T 细胞的生物学也是研究免疫缺陷和宿主-病原体相互作用的核心内容。作为表面标志物和信号枢纽,CD4 常被用于探究调控淋巴细胞发育、效应极化以及免疫细胞通讯的相关通路。
CD4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CD4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CD4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CD4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CD4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。