CD38CRISPR激活质粒(h): sc-401117-ACT

人类 CD38 基因编码一种多功能的 II 型跨膜糖蛋白，兼具胞外酶和受体作用，能够催化 NAD⁺ 代谢，生成环状 ADP-核糖（cADPR）和 ADP-核糖等信号介质。通过调控细胞内 Ca²⁺ 动员及 NAD⁺ 依赖性信号传导，CD38 影响免疫细胞在炎症微环境中的活化、黏附与相互通讯。CD38 的活性与细胞代谢和应激反应调控通路相互交叉，其表达异常常在免疫失衡与血液系统恶性肿瘤相关生物学研究中被重点关注。作为表面标志物与信号枢纽，CD38 常用于研究其在淋巴细胞分化、髓系细胞功能以及肿瘤—免疫相互作用中的作用。

CD38 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性CD38的表达。

CD38 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的CD38基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于CD38转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性CD38表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的CD38位点，并能够研究内源性位点上依赖于CD38的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在CD38表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟CD38通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。