Date published: 2026-7-21

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CD19双切口酶质粒(h): sc-400719-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • CD19 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • CD19双切酶质粒(h)和CD19双切酶质粒(h2)编码针对CD19的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:CD19: sc-390244,通过WB, IF或者IHC分析
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    CD19双切口酶质粒(h)

    sc-400719-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    CD19双切口酶质粒(h2)

    sc-400719-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    CD19 是一种 B 细胞特异性的跨膜糖蛋白,作为共受体通过与 CD21 和 CD81 组织信号复合物来放大 B 细胞受体(BCR)信号。通过调控 PI3K–AKT、MAPK/ERK 以及钙依赖性通路,CD19 有助于设定决定 B 细胞增殖、分化和抗体应答的激活阈值。CD19 的表达与 B 细胞谱系承诺和生发中心动态过程密切相关,其失调也常被用作研究 B 细胞恶性肿瘤和免疫介导性病理的分子特征。作为具有明确信号功能的表面标志物,CD19 为解析 B 细胞信号网络和抗原驱动的选择过程提供了一个易于切入的研究入口。

    CD19 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CD19 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CD19内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CD19的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CD19基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。