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CD130/gp130双切口酶质粒(h) | sc-400301-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CD130/gp130双切口酶质粒(h2) | sc-400301-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
IL6ST 编码 CD130/gp130,是 IL‑6 家族细胞因子受体的共同信号转导亚基,负责将配体结合与细胞内激酶级联反应相耦联。受体复合体形成后,gp130 可激活 JAK 激酶及其下游的 STAT3/STAT1,也能联动 MAPK/ERK 和 PI3K–AKT 通路,从而调控控制炎症、分化、生存以及急性期反应的转录程序。作为细胞因子信号传导的关键枢纽,IL6ST 依赖的信号异常与免疫稳态失衡有关,并已在慢性炎症状态以及致癌性 STAT3 通路激活等背景中得到研究。这些特性使 gp130 成为研究人类细胞中细胞因子应答机制、转录重编程以及通路串扰的常用靶点。
CD130/gp130 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IL6ST 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IL6ST内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IL6ST的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IL6ST基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。