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CD13双切口酶质粒(h) | sc-401095-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CD13双切口酶质粒(h2) | sc-401095-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ANPEP 编码 CD13,这是一种锌依赖性的膜结合丙氨酰氨肽酶,表达于髓系细胞、血管内皮区室以及多种上皮组织中,在这些组织里调控细胞外肽类加工与氨基酸供给。CD13 参与对生物活性肽的蛋白水解性调控,并与细胞黏附、运动以及微环境重塑相互关联,将其酶学活性与炎症信号传导和组织稳态联系起来。通过影响白细胞迁移、血管生成反应以及蛋白酶网络,CD13 常被用作髓系分化与细胞活化状态的功能性标志物。ANPEP/CD13 的表达或活性失调与免疫细胞行为改变及肿瘤相关基质相互作用异常有关,因此支持在炎症与肿瘤生物学中开展机制研究。
CD13 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ANPEP 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ANPEP内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ANPEP的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ANPEP基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。