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CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1双切口酶质粒(h) | sc-400648-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1双切口酶质粒(h2) | sc-400648-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CNR1 编码大麻素受体 1(CB1),这是一种与 Gi/o 蛋白偶联的 GPCR,可响应内源性大麻素,从而调控腺苷酸环化酶活性、cAMP/PKA 信号传导、离子通道电导,以及下游的 MAPK/ERK 与 PI3K 相关通路。CB1 在神经系统中广泛表达,参与突触传递、神经递质释放和依赖活动的可塑性,同时在外周代谢与免疫相关过程中也具有作用。CNR1/CB1 信号的异常与神经精神和神经退行性表型、疼痛加工以及代谢失调有关,因此它是 GPCR 药理学与神经调制回路中常被研究的关键节点。在细胞模型中,扰动 CNR1 常用于探究受体去敏化/内吞、G 蛋白偶联偏向性,以及影响神经元兴奋性与炎症信号的通路串扰。
CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CNR1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CNR1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CNR1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CNR1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。