Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CAR Antibody (E-1) Alexa Fluor® 488: sc-373791 AF488. Direct fluorescent western blot analysis of CAR expression in F9 whole cell lysate. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Cruz Marker™ Molecular Weight Standards detected with Cruz Marker™ MW Tag-Alexa Fluor® 647: sc-516791.
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CAR双切口酶质粒(m): sc-419887-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CAR 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CAR双切酶质粒（m）和CAR双切酶质粒（m2）编码针对Cxadr的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CAR: sc-373791，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CAR双切口酶质粒(m) | sc-419887-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CAR双切口酶质粒(m2) | sc-419887-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Cxadr 编码柯萨奇病毒与腺病毒受体（CAR）。CAR 属于免疫球蛋白超家族的细胞黏附分子，主要富集于上皮和内皮细胞的紧密连接处。CAR 通过与支架蛋白及细胞骨架调控因子的相互作用，参与细胞间黏附、顶端—基底侧极性建立以及连接结构的组织与维持，因此与调控屏障完整性和组织形态发生的通路密切相关。在小鼠模型中，人们常在病毒入侵机制、心脏发育与传导以及上皮稳态等研究背景下考察 CAR 的表达或定位改变，使 Cxadr 成为研究宿主—病原体相互作用与依赖细胞连接的信号传导的一个重要节点。
CAR 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Cxadr 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Cxadr内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Cxadr的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Cxadr基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。