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c-Fos双切口酶质粒(h) | sc-400009-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
c-Fos双切口酶质粒(h2) | sc-400009-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 FOS 基因编码 c-Fos,这是一种即刻早期转录因子,可与 JUN 家族蛋白二聚形成 AP-1,从而将细胞外刺激迅速耦联到基因表达程序。c-Fos 可在 MAPK/ERK、JNK、p38 以及钙依赖性信号通路的下游被诱导,并调控转录网络,进而控制细胞增殖、分化、应激反应、凋亡和细胞运动。通过 AP-1 依赖性地调控细胞因子、基质重塑酶以及细胞周期调控因子,FOS 在多种细胞类型中整合炎症与促有丝分裂信号。FOS/AP-1 活性失衡常被用作通路激活的分子读出,并在与疾病相关的情境中与致癌信号、异常免疫激活以及神经元可塑性改变相关。
c-Fos 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FOS 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FOS内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FOS的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FOS基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。