非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
BSEP 抗体（F-6）：sc-74500。K-562（A）、未经处理的 HCT-116（B）和化学处理的 HCT-116（C）全细胞裂解液中 BSEP 表达的 Western 印迹分析。β-Actin (C4)：sc-47778用作加载对照。所用检测试剂：m-IgG Fc BP-HRP：sc-525409。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
BSEP双切口酶质粒(h): sc-400742-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- BSEP 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- BSEP双切酶质粒（h）和BSEP双切酶质粒（h2）编码针对ABCB11的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：BSEP: sc-74500，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
BSEP双切口酶质粒(h) | sc-400742-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
BSEP双切口酶质粒(h2) | sc-400742-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ABCB11 编码胆盐输出泵（BSEP），这是一种位于胆小管膜的 ATP 结合盒（ABC）转运体，可将胆汁酸在 ATP 依赖下从肝细胞外排进入胆汁。BSEP 的活性是肠肝循环和肝内胆汁酸稳态的关键环节，并与胆汁酸的合成、结合以及 FXR 介导的反馈调控等信号通路协同作用。ABCB11 功能受损会改变胆汁酸组成并导致其在细胞内蓄积，从而扰乱肝胆系统的膜完整性、氧化应激反应和炎症信号传导。ABCB11 的遗传变异或表达降低与胆汁淤积表型相关，为研究转运体生物学以及胆汁酸驱动的肝脏病理提供了重要的机制切入点。
BSEP 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ABCB11 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ABCB11内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ABCB11的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ABCB11基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。