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Bmi-1双切口酶质粒(h) | sc-417606-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Bmi-1双切口酶质粒(h2) | sc-417606-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
BMI1 编码 Bmi-1 蛋白,它是多梳(Polycomb)组转录抑制因子,也是 PRC1 复合体的核心组分;PRC1 通过催化组蛋白 H2A 的泛素化来实现稳定的基因沉默。Bmi-1 通过抑制 CDKN2A 位点(p16INK4A/p14ARF)并调控细胞衰老、分化以及 DNA 损伤应答,帮助维持干细胞和祖细胞的自我更新能力。借助染色质压缩与表观遗传调控,BMI1 影响细胞周期进程、线粒体功能以及对氧化应激的耐受性。BMI1 表达失调常与癌症及其他涉及表观遗传不稳定性的疾病中增殖能力和谱系程序的异常改变相关。
Bmi-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 BMI1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BMI1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏BMI1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了BMI1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。