Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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beta-catenin双切口酶质粒(m): sc-419477-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- beta-catenin 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- beta-catenin双切酶质粒（m）和beta-catenin双切酶质粒（m2）编码针对Ctnnb1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：beta-catenin: sc-7963，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
beta-catenin双切口酶质粒(m) | sc-419477-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
beta-catenin双切口酶质粒(m2) | sc-419477-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Ctnnb1 编码 β-连环蛋白（beta-catenin），这是一种多功能的 armadillo 重复序列蛋白，能够将以钙黏蛋白（cadherin）为基础的黏着连接（adherens junctions）与肌动蛋白细胞骨架耦联，并调控细胞—细胞黏附以及组织结构。在经典 Wnt 信号通路中，稳定化的 β-连环蛋白在胞质中积累并转位入细胞核，与 TCF/LEF 转录因子协同作用，协调控制增殖、分化和干细胞维持的基因程序。β-连环蛋白的活性受“降解复合体”（包括 APC、AXIN 和 GSK3 等）调控，从而整合发育信号与应激响应通路的输入。β-连环蛋白信号或其黏附功能的失调与肿瘤性转化、发育缺陷以及炎症性病理过程相关，使 Ctnnb1 成为机制研究中的关键枢纽基因。
beta-catenin 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Ctnnb1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Ctnnb1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Ctnnb1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Ctnnb1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。