Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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beta-catenin双切口酶质粒(h): sc-400038-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- beta-catenin 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- beta-catenin双切酶质粒（h）和beta-catenin双切酶质粒（h2）编码针对CTNNB1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：beta-catenin: sc-7963，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
beta-catenin双切口酶质粒(h) | sc-400038-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
beta-catenin双切口酶质粒(h2) | sc-400038-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CTNNB1 编码人β-连环蛋白（beta-catenin），这是一种多功能蛋白，既能将以钙黏蛋白（cadherin）为基础的黏附连接（adherens junction）与肌动蛋白细胞骨架相连，也可在经典 Wnt 信号通路中作为转录共调节因子发挥作用。在缺乏 Wnt 配体时，β-连环蛋白会被 APC–AXIN–GSK3 降解复合体磷酸化并被靶向至蛋白酶体降解；而当通路被激活时，β-连环蛋白得到稳定并进入细胞核，协同激活 TCF/LEF 依赖的基因表达程序，从而调控增殖、分化与干细胞维持。CTNNB1 的异常活性或稳定化会扰乱细胞命运决定、上皮完整性和发育模式建立，并常与致癌信号及组织特异性的发育异常（发育不良）相关。作为整合细胞黏附与 Wnt 通路输出的关键节点效应因子，CTNNB1 被广泛用于研究 EMT、接触抑制、类器官生物学，以及与 Hippo 和生长因子信号的通路串扰等情境。
beta-catenin 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CTNNB1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CTNNB1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CTNNB1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CTNNB1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。