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Bax双切口酶质粒(m) | sc-419292-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Bax 基因编码 BAX,这是一种促凋亡的 BCL-2 家族效应蛋白,负责调控线粒体外膜通透化,并决定细胞进入内源性凋亡的承诺。在细胞受到应激时,BAX 发生构象激活并在线粒体处寡聚化,促进细胞色素 c 释放、凋亡小体形成以及半胱天冬酶级联反应的激活。BAX 的活性与 p53 信号、BH3-only 调控因子以及 PI3K–AKT 等生存通路相整合,从而调节细胞的凋亡阈值。Bax 依赖性细胞死亡的失调与肿瘤发生、神经退行性变和组织损伤等研究密切相关,因为线粒体凋亡的改变会影响细胞命运与应激反应。
Bax 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Bax 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Bax内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Bax的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Bax基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。