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Bax双切口酶质粒(h) | sc-400042-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Bax双切口酶质粒(h2) | sc-400042-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
BAX 编码 Bax 蛋白,Bax 是 BCL-2 家族中促凋亡的效应分子,负责调控线粒体外膜通透化(MOMP),并使细胞不可逆地进入内源性凋亡。面对细胞应激和 DNA 损伤信号时,Bax 发生构象激活,转位至线粒体并形成寡聚体,从而促进细胞色素 c 释放以及下游半胱天冬酶(caspase)的激活。Bax 的活性与 p53 调控的检查点及细胞存活信号网络相互整合,因此在发育与组织稳态维持过程中影响细胞命运决策。BAX 信号失调被广泛认为与肿瘤生物学、神经退行性变以及对基因毒性应激的反应相关,使其成为研究凋亡与线粒体通路调控的常用关键节点。
Bax 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 BAX 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BAX内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏BAX的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了BAX基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。