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B7-H3双切口酶质粒(h) | sc-402032-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
B7-H3双切口酶质粒(h2) | sc-402032-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CD276 编码免疫调节性细胞表面糖蛋白 B7-H3。B7-H3 属于 B7 家族成员,能够调控 T 细胞及先天免疫信号,并且也与癌症生物学中的细胞内在程序相关。在人体组织中,B7-H3 会影响细胞因子网络以及类似免疫检查点的相互作用,同时还会调节与黏附、迁移和生存信号相关的通路。CD276 表达失调在多种实体瘤中十分常见,并与免疫逃逸表型以及肿瘤微环境串扰改变有关。这些特性使 CD276 成为研究免疫调控机制及肿瘤相关信号回路的有用靶点。
B7-H3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CD276 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CD276内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CD276的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CD276基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。