Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
B7-2 Antibody (D-6) Alexa Fluor® 488: sc-28347 AF488. Direct fluorescent western blot analysis of B7-2 expression in Raji (A), Ramos (B), Jurkat (C), IB4 (D) and NAMALWA (E) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Cruz Marker™ Molecular Weight Standards detected with Cruz Marker MW Tag-Alexa Fluor® 647: sc-516791.
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B7-2双切口酶质粒(m): sc-419575-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- B7-2 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- B7-2双切酶质粒（m）和B7-2双切酶质粒（m2）编码针对Cd86的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：B7-2: sc-28347，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
B7-2双切口酶质粒(m) | sc-419575-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
B7-2双切口酶质粒(m2) | sc-419575-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Cd86 编码共刺激受体 B7-2（CD86），这是一种 I 型膜糖蛋白，主要表达于树突状细胞、巨噬细胞和 B 细胞等抗原呈递细胞上。B7-2 通过与 T 细胞上的 CD28 和 CTLA-4 结合，将先天免疫感知与适应性免疫的激活与耐受整合在一起，影响 IL-2 产生以及 T 细胞的增殖与分化。Cd86 的表达可由包括 TLR/NF-κB 信号在内的炎症刺激诱导，并决定淋巴组织中抗原驱动反应的强度与质量。由 CD86 介导的共刺激若发生失调，与自身免疫和炎症性疾病的机制相关，并在移植排斥、过敏以及肿瘤—免疫相互作用等模型中被广泛研究。
B7-2 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Cd86 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Cd86内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Cd86的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Cd86基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。