Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ATF-4 Antibody (B-3): sc-390063. Western blot analysis of ATF-4 expression in Jurkat nuclear extract (A) and NIH/3T3 whole cell lysate (B).
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ATF4双切口酶质粒(m): sc-419228-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ATF4 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- ATF4双切酶质粒（m）和ATF4双切酶质粒（m2）编码针对Atf4的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ATF4: sc-390063，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ATF4双切口酶质粒(m) | sc-419228-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ATF4双切口酶质粒(m2) | sc-419228-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Atf4 基因编码激活转录因子 4（ATF4），这是一种 bZIP 转录因子，负责协调整合应激反应（ISR）程序，从而调控氨基酸代谢、氧化还原平衡以及蛋白质稳态。ATF4 在 eIF2α 磷酸化下游被诱导表达，并与内质网应激/未折叠蛋白反应（ER stress/UPR）信号通路发生交叉，进而调控参与自噬、线粒体功能及适应性转录重塑的相关基因。通过这些通路，ATF4 在营养缺乏、氧化应激和缺氧条件下影响细胞生存与死亡的决策，与神经退行性疾病、代谢功能障碍、炎症以及肿瘤生物学等广泛领域密切相关。Atf4 活性受扰动还与成骨细胞分化改变及骨骼稳态失衡有关，支持其用于发育及组织应激模型研究。
ATF4 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Atf4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Atf4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Atf4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Atf4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。