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Arginase 2/ARG2双切口酶质粒(h) | sc-400639-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Arg2双切口酶质粒(h2) | sc-400639-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 ARG2 基因编码精氨酸酶 2(arginase 2),这是一种位于线粒体、依赖锰的酶,能够将 L-精氨酸水解为 L-鸟氨酸和尿素,从而把氨基酸分解代谢与尿素循环以及多胺/脯氨酸生物合成通路联系起来。由于与一氧化氮合酶竞争 L-精氨酸,ARG2 可调节一氧化氮的可用性及其下游的氧化还原、炎症和血管信号程序。ARG2 活性与线粒体代谢以及免疫细胞功能极化相整合,并通过鸟氨酸衍生的多胺影响细胞增殖与应激反应。精氨酸代谢失衡及 ARG2 表达改变与心代谢和炎症状态相关,并已在肿瘤微环境的营养竞争、内皮功能障碍等情境中受到研究。
Arginase 2/ARG2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ARG2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ARG2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ARG2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ARG2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。