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Anillin慢病毒激活颗粒(h) | sc-403342-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
ANLN 编码 anillin,这是一种保守的肌动蛋白和肌球蛋白结合型支架蛋白,在细胞质分裂过程中负责组织收缩环并稳定裂沟。Anillin 协调 RhoA 依赖的肌动-肌球蛋白重塑,并将 F-肌动蛋白与 septin 及膜相关因子连接起来,以确保中体正确形成并顺利完成断裂分离(abscission),从而把细胞周期推进与细胞骨架动态变化耦联起来。ANLN 表达或功能失调与异常细胞分裂、基因组不稳定性以及在多种癌症和增殖性疾病背景中观察到的增殖状态改变相关。作为连接细胞骨架组织与有丝分裂调控的关键节点,ANLN 常用于研究细胞圆整、非纺锤体依赖的裂沟定位以及与非整倍体相关的表型机制。
Anillin 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 ANLN 表达。
Anillin 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在ANLN转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Anillin表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 ANLN 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。