Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
AMPK alpha 1/2 Antibody (D-6): sc-74461. Western blot analysis of AMPKα1/2 expression in IB4 (A), MCF7 (B), Jurkat (C), HeLa (D) and K-562 (E) whole cell lysates.
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AMPK alpha 1双切口酶质粒(h): sc-400104-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- AMPK alpha 1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- AMPK alpha 1双切酶质粒（h）和AMPK alpha 1双切酶质粒（h2）编码针对PRKAA1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：AMPK alpha 1: sc-398861，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
AMPK alpha 1双切口酶质粒(h) | sc-400104-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
AMPK alpha 1双切口酶质粒(h2) | sc-400104-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
PRKAA1 编码 AMP 活化蛋白激酶（AMPK）的催化性 α1 亚基。AMPK 是细胞能量状态的核心感应器，会在 AMP/ADP 水平升高以及 LKB1、CAMKK2 等上游激酶的作用下被激活。AMPKα1 通过调控葡萄糖摄取与糖酵解、抑制 mTORC1 从而抑制合成代谢程序，并通过磷酸化下游效应因子促进自噬与线粒体稳态，从而协同细胞的代谢适应。借助这些作用，AMPK 信号通路塑造细胞对营养压力、缺氧和氧化应激的反应，并影响细胞生长、脂质代谢和炎症信号传导。PRKAA1/AMPKα1 活性失调与多种代谢性疾病表型相关；在肿瘤生物学研究中也常被重点关注，因为代谢重编程会影响细胞增殖与存活。
AMPK alpha 1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PRKAA1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PRKAA1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PRKAA1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PRKAA1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。