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Akt2双切口酶质粒(m) | sc-419072-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Akt2双切口酶质粒(m2) | sc-419072-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Akt2 编码丝氨酸/苏氨酸激酶 AKT2,是 PI3K 信号通路的核心效应分子,可将生长因子及胰岛素受体的输入信号耦联到下游对葡萄糖摄取、糖原合成、脂质代谢以及细胞存活的调控。在小鼠组织中,AKT2 活性会影响葡萄糖转运蛋白的膜转运、受 mTORC1 调控的合成代谢程序,以及通过磷酸化介导的对促凋亡因子的抑制,例如 FOXO 家族转录因子。AKT2 信号失调与胰岛素敏感性和代谢稳态的改变相关,而该通路的异常激活也常在增殖、应激反应和致癌信号模型中被研究。作为整合受体酪氨酸激酶线索与代谢及细胞周期调控网络的关键节点,Akt2 被广泛用于脂肪细胞、肝细胞、肌细胞以及多种癌细胞相关研究场景中。
Akt2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Akt2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Akt2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Akt2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Akt2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。