Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Akt2 siRNA (h): sc-29197. Western blot analysis of Akt2 expression in non-transfected control (A) and Akt2 siRNA transfected (B) HeLa cells. Blot probed with Akt2 Antibody (F-7): sc-5270. Lamin A/C (H-110): sc-20681 used as specificity and loading control.
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Akt2双切口酶质粒(h): sc-400060-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Akt2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Akt2双切酶质粒（h）和Akt2双切酶质粒（h2）编码针对AKT2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Akt2: sc-5270，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Akt2双切口酶质粒(h) | sc-400060-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Akt2双切口酶质粒(h2) | sc-400060-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
AKT2 编码丝氨酸/苏氨酸激酶 Akt2，是 PI3K–AKT 信号轴的核心效应分子之一，将受体酪氨酸激酶与胰岛素信号连接到细胞代谢、生长与存活等过程。Akt2 通过磷酸化 AS160/TBC1D4、GSK3 等下游底物来调控葡萄糖摄取和糖原合成，并可通过 TSC2 和 PRAS40 参与对 mTORC1 的调控。在人类细胞中，AKT2 活性有助于协调胰岛素应答的代谢程序，并可调节细胞周期进程、抗凋亡能力及应激反应。AKT2 信号异常与代谢功能障碍有关，也与肿瘤相关通路的重编程相关；在这些情况下，PI3K/AKT 通路组分常出现失调。
Akt2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 AKT2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对AKT2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏AKT2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了AKT2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。