Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
AFP Antibody (E-7): sc-166450. Western blot analysis of AFP expression in non-transfected: sc-117752 (A) and human AFP transfected: sc-114125 (B) 293T whole cell lysates.
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AFP/Alpha fetoprotein双切口酶质粒(h): sc-400355-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- AFP/Alpha fetoprotein 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- AFP/Alpha fetoprotein双切酶质粒（h）和AFP/Alpha fetoprotein双切酶质粒（h2）编码针对AFP的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：AFP/Alpha fetoprotein: sc-8399，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
AFP/Alpha fetoprotein双切口酶质粒(h) | sc-400355-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AFP/Alpha fetoprotein双切口酶质粒(h2) | sc-400355-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AFP 编码甲胎蛋白（alpha-fetoprotein），这是一种分泌型糖蛋白，在胎儿发育期间高水平表达，而在出生后多数组织中通常被沉默。AFP 与肝细胞分化程序以及从胎儿到成人的转录切换相关，其再表达反映了在肝脏和生殖细胞相关环境中基因调控的改变。在肿瘤生物学中，AFP 被广泛用作与肝细胞癌及某些生殖细胞肿瘤相关的分子标志物，支持对肿瘤细胞状态、谱系身份以及致癌性转录网络的研究。作为一种循环中的、与肿瘤相关的抗原，AFP 也可作为读出指标，用于研究分泌通路动力学以及与应激相关的蛋白质生成变化。
AFP/Alpha fetoprotein 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 AFP 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对AFP内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏AFP的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了AFP基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。