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AdipoR2CRISPR激活质粒(h) | sc-401848-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
ADIPOR2 编码脂联素受体 2(AdipoR2),这是一种七次跨膜受体,可在多种组织中介导脂联素依赖的代谢信号传导。AdipoR2 的激活可促进脂肪酸氧化并维持葡萄糖稳态,这一作用部分通过与 AMPK 和 PPARα 相关的转录程序实现,同时还会影响细胞应激反应和炎症信号。ADIPOR2 的表达或信号传导异常与胰岛素抵抗、代谢综合征、非酒精性脂肪性肝病以及更广泛的心代谢风险相关,因此是研究脂肪因子通路机制的重要靶点。
AdipoR2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ADIPOR2的表达。
AdipoR2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的ADIPOR2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于ADIPOR2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性AdipoR2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的ADIPOR2位点,并能够研究内源性位点上依赖于AdipoR2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ADIPOR2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟AdipoR2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。