非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
a-Actin (1A4): sc-32251. IMR-32 (A) 和 C2C12 (B) 全细胞裂解液中 a-Actin 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
ACTA2双切口酶质粒(h): sc-400003-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ACTA2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- ACTA2双切酶质粒（h）和ACTA2双切酶质粒（h2）编码针对ACTA2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：α-Actin: sc-32251，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ACTA2双切口酶质粒(h) | sc-400003-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ACTA2双切口酶质粒(h2) | sc-400003-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ACTA2 编码 α-平滑肌肌动蛋白（ACTA2），这是一种核心收缩丝状蛋白，富集于血管平滑肌细胞和肌成纤维细胞中。ACTA2 通过聚合形成 F-肌动蛋白应力纤维并与肌球蛋白马达相互作用，维持细胞骨架张力、黏着斑动力学以及机械传导相关程序，从而影响细胞迁移与细胞外基质重塑。ACTA2 的功能与 RhoA/ROCK 信号、TGF-β 驱动的分化过程，以及 SRF/MRTF 对收缩相关基因表达的转录调控相互交叉。ACTA2 的失调或突变与血管平滑肌功能障碍及重塑表型有关，包括增加胸主动脉瘤/夹层风险；同时它也广泛用于纤维化与异常收缩力相关研究。
ACTA2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ACTA2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ACTA2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ACTA2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ACTA2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。