Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
α-sarcoglycan Antibody (D-7): sc-271321. Fluorescent western blot analysis of α-sarcoglycan expression in HeLa (A), A-673 (B), Sol8 (C), K-562 (D) and NIH/3T3 (E) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgG1 BP-CFL 488: sc-533661.
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α-sarcoglycan双切口酶质粒(m): sc-422904-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- α-sarcoglycan 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- α-sarcoglycan双切酶质粒（m）和α-sarcoglycan双切酶质粒（m2）编码针对Sgca的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：α-sarcoglycan: sc-271321，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
α-sarcoglycan双切口酶质粒(m) | sc-422904-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
Sgca 编码 α-肌聚糖（α-sarcoglycan），它是肌营养不良蛋白–糖蛋白复合体（dystrophin–glycoprotein complex, DGC）中肌聚糖亚复合体的核心组分。该复合体可稳定肌纤维膜，并将细胞骨架与细胞外基质连接起来。在骨骼肌和心肌中，α-肌聚糖在收缩过程中维持肌膜（sarcolemma）的完整性，并参与影响钙离子处理、膜修复和细胞骨架组织的机械转导通路。肌聚糖依赖的结构一旦受损，会导致膜脆弱、肌纤维变性以及慢性重塑，因此 Sgca 常被用作模拟 DGC 功能障碍的经典位点。因而，对小鼠 Sgca 的扰动有助于研究肌肉稳态、应激反应以及与肌营养不良样表型相关的通路。
α-sarcoglycan 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Sgca 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Sgca内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Sgca的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Sgca基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。