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ZAG双切口酶质粒(h) | sc-401706-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ZAG双切口酶质粒(h2) | sc-401706-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
AZGP1 编码锌-α2-糖蛋白(ZAG),这是一种分泌型、结构类似 MHC I 类分子的糖蛋白,参与脂质动员与全身能量稳态调控。ZAG 由上皮组织及脂肪相关组织产生,并与脂肪细胞代谢调节、细胞外信号传递以及组织微环境内的炎症串扰有关。多种癌症类型和代谢性疾病中均有 AZGP1 表达异常的报道,并且其变化与分化状态、营养物质利用以及分解代谢程序的改变相关。这些关联使 AZGP1/ZAG 成为研究代谢重编程、上皮生物学以及肿瘤—基质相互作用的有用标志物和关键机制节点。
ZAG 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 AZGP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对AZGP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏AZGP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了AZGP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。