非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
ZAG 抗体 (F-6): sc-271957. 非转染: sc-117752 (A) 和小鼠 ZAG 转染: sc-124693 (B) 293T 全细胞裂解液中 ZAG 表达的近红外 western 印迹分析. 用 UltraCruz® 阻断试剂: sc-516214 阻断. 所用检测试剂: m-IgGλ BP-CFL 680: sc-516194.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
ZAG CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-419279
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ZAG CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在ZAG基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ZAG: sc-271957，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ZAG CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-419279 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
Azgp1 编码锌-α2-糖蛋白（zinc-α2-glycoprotein，ZAG）。ZAG 是一种分泌型、类似脂肪因子的糖蛋白，在多种组织中表达，参与全身脂质动员与能量平衡的维持。在小鼠代谢网络中，ZAG 被认为与脂肪细胞脂解的调控、脂肪酸利用的调节，以及在脂肪组织和肝脏微环境中与炎症信号的相互作用有关。Azgp1/ZAG 表达的改变常在与肥胖相关的代谢功能障碍、胰岛素敏感性变化的研究中被重点关注，同时也涉及更广泛的恶病质与炎症相关表型。作为一种循环中存在并可与细胞外基质相关联的因子，ZAG 也与组织重塑和细胞间通讯的研究密切相关。
ZAG CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Azgp1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Azgp1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Azgp1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使ZAG蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Azgp1缺失的细胞模型，用于ZAG信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 ZAG 功能至关重要的 Azgp1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Azgp1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 ZAG CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 ZAG CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Azgp1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 ZAG HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 ZAG HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Azgp1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Azgp1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。