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YY2双切口酶质粒(m) | sc-437263-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Yy2 基因编码 YY2,这是一种与 YY1 相关的 C2H2 型锌指转录因子,可结合富含 GC 的 DNA 元件并调控启动子活性,从而塑造基因表达程序。研究表明,YY2 参与与染色质组织、发育调控以及细胞周期相关基因网络相关的转录控制,在不同情境下可作为激活因子或抑制因子发挥作用。通过这些调控功能,Yy2 为研究影响细胞身份与应激反应的转录回路及全基因组结合动态提供了切入点。YY 家族转录程序的失调与异常增殖和分化模型相关,因此 Yy2 可作为开展基因调控机制研究的一个重要靶点。
YY2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Yy2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Yy2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Yy2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Yy2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。