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YB-1双切口酶质粒(h) | sc-401385-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
YB-1双切口酶质粒(h2) | sc-401385-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
YBX1 编码 Y-box 结合蛋白 1(YB-1),这是一种多功能的 DNA/RNA 结合因子,可协调转录调控、mRNA 剪接、稳定性与翻译等过程。YB-1 参与细胞应激反应和信号转导网络,包括与 MAPK/ERK 和 PI3K/AKT 活性相关的通路,并调节与增殖、生存以及上皮–间质可塑性相关基因的表达。通过其在染色质相关转录控制以及核糖核蛋白复合体中的作用,YB-1 影响细胞周期进程、DNA 损伤应答和适应性应激程序。YBX1 表达失调或 YB-1 的磷酸化异常与肿瘤生物学、耐药表型及炎症信号有关,使其成为癌症与细胞应激研究中用于机制解析的重要节点。
YB-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 YBX1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对YBX1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏YBX1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了YBX1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。