Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
WTAP Antibody (D-7): sc-374280. Western blot analysis of WTAP expression in K-562 nuclear extract (A) and THP-1 (B) and NIH/3T3 (C) whole cell lysates.
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WTAP CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-425635
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- WTAP CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在WTAP基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：WTAP: sc-374280，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
WTAP CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-425635 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
Wtap 编码 WTAP（Wilms 肿瘤 1 相关蛋白），是 mRNA N6-甲基腺苷（m6A）“写入”复合体的核心调控组分，能够支持 METTL3/METTL14 的催化活性，并协调甲基化机器在细胞核内的定位。WTAP 通过 m6A 依赖性地调控前体 mRNA（pre-mRNA）加工、可变剪接、转录本稳定性以及翻译过程，进而影响细胞周期进程、谱系决定以及应激响应基因表达程序。WTAP 的活性与核斑（nuclear speckles）中的 RNA 代谢通路相互衔接，将表转录组调控与发育信号及分化网络连接起来。在模型系统中，WTAP 相关的 m6A 沉积失调已被认为与增殖和分化状态的改变有关，这些改变与癌症生物学以及造血与发育表型相关。
WTAP CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Wtap基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Wtap基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Wtap开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使WTAP蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Wtap缺失的细胞模型，用于WTAP信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 WTAP 功能至关重要的 Wtap 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Wtap 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 WTAP CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 WTAP CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Wtap 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 WTAP HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 WTAP HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Wtap同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Wtap靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。