The Double Nickase Plasmid features a U6 promoter for sgRNA expression, a 20 nt targeting sequence, and a gRNA scaffold to guide Cas9n. It includes a CBh promoter for Cas9n (D10A) and puromycin resistance, GFP for transfection verification, and nuclear localization signals (NLS). The 2A peptide allows co-expression of Cas9n and Puro from a single promoter, enabling precise genome editing with reduced off-target effects.
Wnt-7b双切口酶质粒(m): sc-423722-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Wnt-7b 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Wnt-7b双切酶质粒（m）和Wnt-7b双切酶质粒（m2）编码针对Wnt7b的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Wnt-7b双切口酶质粒(m) | sc-423722-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Wnt-7b双切口酶质粒(m2) | sc-423722-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Wnt7b 基因编码 Wnt-7b，这是一种分泌型糖蛋白配体，可激活 Wnt 信号通路，从而调控胚胎模式形成、组织形态发生以及器官特异性的细胞命运决定。Wnt-7b 可与 Frizzled/LRP 受体结合，既能启动经典的、依赖 β-连环蛋白（β-catenin）的转录，也能激活非经典信号程序，从而影响细胞增殖、极性与迁移。在发育与组织稳态过程中，Wnt-7b 活性与上皮–间质相互作用及血管重塑相关，因此对于研究多种疾病模型中常见的 Wnt 通路输出失调具有重要意义。Wnt7b 表达或信号强度的改变也常被用来评估其对分化状态、细胞外基质动态，以及与生长因子和炎症信号通路串扰的影响。
Wnt-7b 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Wnt7b 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Wnt7b内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Wnt7b的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Wnt7b基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。