Wnt-10bCRISPR激活质粒(m2): sc-423710-ACT-2
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Wnt-10b CRISPER激活质粒（m2）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- Wnt-10b CRISPR 激活质粒 (m2)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 Wnt-10b CRISPR 激活质粒 (m2) 和 Wnt-10b CRISPR 激活质粒 (m22) 编码的 gRNA 分别针对 Wnt10b 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Wnt-10bCRISPR激活质粒(m2) | sc-423710-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
小鼠Wnt10b基因编码分泌型糖蛋白Wnt-10b，它是经典Wnt配体，可激活Frizzled/LRP受体复合体，促进β-连环蛋白（β-catenin）稳定并启动TCF/LEF依赖的转录。Wnt-10b通过调控细胞命运决定、增殖与分化来参与胚胎模式形成和成体组织稳态维持，在成骨细胞发生、抑制脂肪生成以及毛囊和乳腺生物学等方面具有明确作用。Wnt10b信号失调与骨量改变、代谢与脂肪表型异常以及情境依赖的肿瘤相关Wnt通路激活有关，因此是研究Wnt/β-连环蛋白动态机制的有价值靶点。对小鼠细胞或模型中的Wnt10b进行基因编辑，可借助报告基因检测、分化体系和体内谱系追踪分析，对配体特异性Wnt信号、通路串扰以及发育或代谢表型进行功能解析。
Wnt-10b CRISPR激活质粒（m2）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Wnt10b的表达。
Wnt-10b CRISPR激活质粒（m2）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的Wnt10b基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于Wnt10b转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Wnt-10b表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的Wnt10b位点，并能够研究内源性位点上依赖于Wnt-10b的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Wnt10b表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Wnt-10b通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。