非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Wee 1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h): sc-400701. 空载体对照 (A) 和 Wee 1 CRISPR/Cas9 KO 质粒转染 (B) HEK293T 全细胞裂解液中人类 Wee 1 表达的 Western 印迹分析. 用 Wee 1 (B-11): sc-5285 进行印迹探针, 用 a-actinin (H-2): sc-17829 作为特异性和负载对照.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Wee 1双切口酶质粒(h): sc-400701-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Wee 1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Wee 1双切酶质粒（h）和Wee 1双切酶质粒（h2）编码针对WEE1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Wee 1: sc-5285，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Wee 1双切口酶质粒(h) | sc-400701-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Wee 1双切口酶质粒(h2) | sc-400701-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 **WEE1** 基因编码 Wee1 激酶，它是 G2/M 检查点的核心调控因子，通过抑制性磷酸化抑制 CDK1–Cyclin B 的活性，从而协调 DNA 复制完成与进入有丝分裂之间的衔接。Wee1 整合来自 DNA 损伤与复制压力通路的信号，并与 ATR/CHK1 信号协同，稳定停滞的复制叉并维持基因组完整性。WEE1 功能或表达的改变与细胞周期进程失调、复制压力耐受以及染色体不稳定性相关，这些过程在癌症生物学研究中经常被关注。作为一种检查点激酶，Wee1 也与细胞凋亡、有丝分裂灾难以及对 DNA 修复通路依赖性的研究密切相关。
Wee 1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 WEE1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对WEE1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏WEE1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了WEE1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。